Гульельмо Гаспаррини родился 13 июня (или 14 июня) 1804 года в Кастельгранде. Начальное образование получал в родном городе, затем переехал в Неаполь, где в 1823 году получил диплом ветеринара. Затем Гаспаррини некоторое время учился в Неаполитанском ботаническом саду у М. Теноре и Дж. Гуссоне.
До 1842 года Гульельмо возглавлял Ботанический сад Боккадифалько в Палермо, затем вернулся в Неаполь, став преподавателем в ветеринарной школе.
В 1844 году Гаспаррини получил назначение профессором Неаполитанского университета.
В 1857 году Гаспаррини стал профессором и директором Ботанического сада Павии.
В 1861 году вновь переехал в Неаполь, возглавив Ботанический сад.
В 1862 году Гаспаррини был избран членом Национальной академии наук.Скончался Гульельмо Гаспаррини 28 июня 1866 года в Неаполе.