Уиллем (Уильям) Дефо (англ. Willem Dafoe) родился 22 июля 1955 года в городе Эпплтон (штат Висконсин, США).
Он с детства увлекался театром и искусством. Повзрослев, Уильям принимает решение изучать драматическое искусство.
Он поступил в университете Милуоки, который так и не сумел закончить: начинающий актёр отправился на гастроли с авангардным театром «Theatre X» .Уиллему, впрочем, не пришлось сожалеть о неоконченной учёбе в университете. Вместе с театром он очень успешно гастролировал по США и Европе в течении 4-х лет. Впоследствии Дефо поселился в Нью-Йорке, где начал работать в театральной труппе «The Performance Group» .
В 1980 году молодой актёр снялся в фильме Майкла Чимино «Врата рая» , однако кадры с его участием не вошли в конечную версию картины.
В последующие годы Дефо снялся в фильмах «Нелюбимый» Кэтрин Бигелоу и «Жить и умереть в Лос-Анжелесе» Уильяма Фридкина, которые принесли ему известность. Критики позитивно оценили игру актёра.
В 1986 году за роль в фильме Оливера Стоуна «Взвод» Уиллем Дефо был номинирован на «Оскар» как «Лучший актёр второго плана» . Эта роль является одной из самых удачных работ Дефо в кино.Не менее яркими были его роли в фильмах «Последнее искушение Христа» (1988), «Миссисипи в огне» (1988), «Рождённый четвёртого июля» (1989), «Дикие сердцем» (1990), «Английский пациент» (1996), «Прямая и явная угроза» (1994), «Тень вампира» (2000), «Авиатор» (2004), «Человек-паук» (2007), «Светлячки в саду» (2008), «Антихрист» (2009), «Воины света» (2010), «Прощальное дело» (2010), «Охотник» (2011), «Джон Картер» (2012), «Перекрестный огонь» (2014), «Отель "Гранд Будапешт"» (2014), «Охотник с Уолл-стрит» (2016) и других.Помимо активных съемок в кино, Уиллем Дефо также принимает участие в озвучивании мультфильмов и пробует себя в качестве театрального актёра.